一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法及试剂盒

摘要

本发明涉及生物学检测技术领域，具体涉及一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测检测方法及试剂盒，在膜上固定肾综合征出血热病毒抗原，加入待检血清，待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体和所述固定在膜上的抗原结合，再加入含有鼠抗人IgM单抗的金标工作液，鼠抗人IgM单抗与待检血清中的肾综合征出血热抗体结合，显示出红色，最后加入洗涤液，洗去多余的金标工作液和其他杂质。本发明本发明试剂盒具有保质期较长、交叉反应少、显色性能较优等特点。

主权项

一种肾综合征出血热病毒IgM抗体检测方法，在膜上固定肾综合征出血热病毒抗原，加入待检血清，待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体和所述固定在膜上的抗原结合，再加入含有鼠抗人IgM单抗的金标工作液，鼠抗人IgM单抗与待检血清中的肾综合征出血热病毒IgM抗体结合，显示出红色，最后加入洗涤液，洗去多余的金标工作液和其他杂质，其特征在于：所述金标工作液采用如下方法制得：⑴制备金标浓缩液：取0.5～1wt%的氯金酸水溶液100ml，加热至沸腾，加入0.4～0.8wt%柠檬酸三钠溶液0.8～1ml，混匀，待溶液颜色由淡黄至蓝色至紫色至完全透明的酒红色，继续煮沸5～15分钟，停止加热，冷却至室温，向得到的溶液中加入1mg/ml的鼠抗人IgM单抗0.2～0.5ml，然后将混合溶液进行离心处理，弃去上清液，得到下层金标浓缩液；⑵制备稀释液：将121.1～242.2mg的三羟甲基氨基甲烷、0.1～0.2mg的氯化钠和0.5～0.7mg的牛血清白蛋白置于容量瓶内，加入双蒸水，使之完全溶解，然后继续加入双蒸水至100mL，再加入0.04～0.07wt%诊断试剂防腐剂PROCLIN300，然后依次加入1～2wt%海藻糖、2ml甘油、0.03～0.05wt%黄原胶与0.8～2.0wt%的羧甲基壳聚糖，再加入0.5ml水杨酸异辛酯一并混匀，最后用盐酸将其pH调节至7.0～7.5，得到所述稀释液；⑶将所述金标浓缩液与稀释液按1：15～30的体积比混合，得到金标工作液；所述洗涤液，包括三羟甲基氨基甲烷、氯化钠和牛血清白蛋白，并采用如下方法制得：将121.1mg～242.2mg的三羟甲基氨基甲烷、0.1mg～1mg的氯化钠和0.1mg～1mg的牛血清白蛋白置于容量瓶内，加入双蒸水，使之完全溶解，然后继续加入双蒸水至100mL，加入0.1～0.2wt%的EDTA，然后再加入体积比为1.5～2.0%的丙醇，混匀后加入0.8～1.5wt%的二氯醋酸及0.2～0.4wt%的TritonX‑100，最后再用氢氧化钠溶液将其pH调节为8.5～9.0，得到洗涤液。