发明名称 |
检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法 |
摘要 |
本发明提供了一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,包括以下步骤:首先取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;将PCR产物用2%-3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12-20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。本发明提供的方法步骤简单、能够有效果的对两种病菌进行检测。 |
申请公布号 |
CN103031383A |
申请公布日期 |
2013.04.10 |
申请号 |
CN201210583426.5 |
申请日期 |
2012.12.28 |
申请人 |
中华人民共和国湖北出入境检验检疫局 |
发明人 |
王振华;张建坤;徐家文;冯汉利 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
武汉华旭知识产权事务所 42214 |
代理人 |
周宗贵;刘荣 |
主权项 |
一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)、取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;(2)、将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;(3)、PCR产物用2%‑3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12‑20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。 |
地址 |
430000 湖北省武汉市汉阳区琴台大道588号 |