发明名称 检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法
摘要 本发明提供了一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,包括以下步骤:首先取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;将PCR产物用2%-3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12-20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。本发明提供的方法步骤简单、能够有效果的对两种病菌进行检测。
申请公布号 CN103031383A 申请公布日期 2013.04.10
申请号 CN201210583426.5 申请日期 2012.12.28
申请人 中华人民共和国湖北出入境检验检疫局 发明人 王振华;张建坤;徐家文;冯汉利
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 武汉华旭知识产权事务所 42214 代理人 周宗贵;刘荣
主权项 一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)、取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;(2)、将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;(3)、PCR产物用2%‑3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12‑20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。
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