一种提高剑麻组培种苗质量的快繁方法

摘要

本发明涉及一种提高剑麻组培种苗质量的快繁方法，该方法包括如下步骤：（1）外植体的处理和消毒；（2）启动与接种；（3）诱导不定芽培养；（4）诱导丛芽培养；（5）继代增殖培养；（6）生根培养；（7）炼苗；（8）假植移栽；（9）袋装疏植苗培育；该方法以SH为基本培养基，采用了活性更强的细胞分裂素TDZ，配合其它适合的培养条件，并采用了不同的组培苗切割方法，改变了剑麻原有育苗方法，可节省育苗时间约6个月，并能有效解决剑麻品种退化、带病等问题，有效地保证了种苗质量，促进剑麻产业的健康发展。

主权项

一种提高剑麻组培种苗质量的快繁方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）外植体的处理和消毒以剑麻的珠芽为外植体材料，选取棚栽20～30cm高的珠芽，进行外植体的消毒，先切除麻根和一部分老茎，用自来水冲洗干净，用手术刀片环剥去外层叶片，保留长0.5cm的心叶2～3张，头茎保留1～1.5cm，冲洗干净并稍凉干后置于无菌室内紫外光照射杀菌20min，然后将材料分别用75%酒精消毒2min，用0.1%升汞消毒15min，再用无菌水冲洗5～6次；（2）启动与接种培养基配制后分装到培养瓶内，置于高温高压力灭菌锅内，于121℃，0.1～0.15MPa下严格灭菌20min，灭菌后供接种使用，在无菌人工接种室，将处理好的材料纵切为4块，接在培养基中；（3）诱导不定芽培养以SH培养基、人工合成的苯基脲衍生物TDZ1.0mg/L、1‑萘乙酸NAA0.1mg/L、蔗糖5%和琼脂0.6%配成的培养基作为培养基，在28±2℃，光照10～12h/d，光照强度1800~2000Lx的条件下培养，20~25天后诱导产生不定芽；（4）诱导丛芽培养培养出不定芽后，留1cm头茎并纵切为2块接种到SH、TDZ0.5mg/L、NAA0.05mg/L、蔗糖5%和琼脂0.6%配成的培养基中，培养温度为27±1℃，光照12h/d，光照强度1800~2000Lx，培养一周后诱导产生丛芽；（5）继代增殖培养通过不断地进行不定单芽的切割诱导产生丛生芽，来获得大量丛生芽，8天左右达到继代增殖；（6）生根培养选择丛生芽中高度3cm以上的芽苗，将丛生芽分离成单芽接种到SH、NAA1.0mg/L、IBA2.0mg/L、活性炭0.1%和蔗糖3%配成的培养基进行诱导生根，培养温度为28±2℃，光照10～12h/d，光照强度3000Lx，培养10‑15天，培养诱导完整植株；（7）炼苗将生根培养获得的剑麻组培苗置于自然光环境下、光线充足而又无直射光的地方，作变温锻炼10～15天；（8）假植移栽将锻炼好的剑麻组培苗，用清水洗净苗根部的培养基，然后把苗的根部浸入0.1%的高锰酸钾液中消毒30秒钟，再将苗种植到育苗穴盘基质中，一个穴孔种植一株苗，将种好的穴盘苗摆放到苗床上，瓶苗的移栽必须在遮光育苗棚中进行，较适宜生长温度在22℃～27℃，要求湿度在70%以下；　（9）袋装疏植苗培育剑麻组培苗经假植移栽达到苗高20cm时便进行疏植苗的培育，培育5～6个月，苗达到展叶20～23片、高40～50㎝、株苗重1～2kg的袋苗上大田种植。