一种基于脲醛树脂涂层的蛋白酶解微流控芯片及其制备方法

摘要

本发明属微流控芯片技术领域，具体为一种基于脲醛树脂涂层的蛋白酶解微流控芯片及其制备方法。本发明将尿素溶于甲醛溶液后加热得脲醛树脂预聚物溶液，将玻璃纤维浸于该溶液中，取出晾干后在其表面形成含活性基团的脲醛树脂预聚物涂层，然后将其浸入含蛋白水解酶的溶液中进一步缩合得固定有蛋白水解酶的脲醛树脂涂层，将修饰后的纤维插入微流控芯片通道内得可换芯蛋白酶解微流控芯片。或者将脲醛树脂预聚物溶液注入微流控芯片通道内，吹干后形成的涂层与含蛋白水解酶的溶液作用得一次性蛋白酶解微流控芯片。本发明可简化芯片制作步骤和降低芯片制作成本，为蛋白的高效酶解和高通量鉴定提供新的技术手段。

主权项

一种基于脲醛树脂涂层的蛋白酶解微流控芯片的制备方法，其特征在于具体步骤如下：（1）通过数控机械雕刻机在有机玻璃板上加工带有开口通道的微流控芯片基片，其中通道结构由计算机辅助设计软件设计；（2）微流控芯片基片带有开口通道的一面与一片相同大小的有机玻璃盖片合上并夹于两片玻璃片后，通过热压键合得有机玻璃微流控芯片；（3）将尿素溶于pH值为7.5‑8.0的甲醛溶液中，然后加热，形成脲醛树脂预聚物水溶液，并用水稀释到需要的浓度；（4）将玻璃纤维浸于脲醛树脂预聚物水溶液中，然后取出晾干；再浸入含有蛋白水解酶的酸性水溶液中1‑10小时，取出后插入有机玻璃微流控芯片中，即得可换芯蛋白酶解芯片；或者：将脲醛树脂预聚物水溶液注入有机玻璃微流控芯片通道中，然后用压缩空气吹干，得脲醛树脂预聚物表面修饰通道，然后将含有蛋白水解酶的酸性水溶液注入，反应1‑10小时，即得一次性蛋白酶解微流控芯片；步骤（1）中数控机械雕刻机加工的通道深度为10‑500微米，底部宽度25‑200微米，上部宽度100‑500微米，且上部宽度大于底部宽度；步骤（2）中，在有机玻璃盖片对应于微流控芯片基片上通道的末端的位置钻有直径为1‑3毫米的圆形小孔，用于进样和收集反应产物；步骤（2）中，热压封装温度为105‑110℃，施加在两片玻璃板上的压力为0.5‑5公斤/平方厘米，热压时间为10‑20分钟。