一种检测中外不同牛群体的基因诊断方法

摘要

本发明公开了一种检测中外不同牛群体的基因诊断试剂盒，属于分子遗传学领域。一种GLI3基因检测中外不同牛群体的方法，包括以引物对P为引物，PCR扩增黄牛GLI3基因；进行DNA测序和SSCP多态性的检测及其不同基因型与经济性状的关联分析。该方法是一种在DNA水平上筛查和检测与中外不同牛群体中特异分子遗传标记，故本发明提供的检测方法可用于区分中外不同牛群体，进而快速建立遗传资源优良的黄牛种群。本发明的优点是：首次提供了在3个黄牛群体中GLI3基因存在一种突变，并且该突变在国外牛品种中不存在多态性。本发明检测方法简单、成本低，检测结果直接、可靠，适用于中外不同牛群体GLI3基因大规模的筛查和诊断。

主权项

一种检测黄牛GLI3基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，(1)以包含GLI3基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛GLI3基因，所述的引物对P为：上游引物：5’‑CAGGGGAAAAGGATGGG‑3’；下游引物：5’‑CGAGGTAAGTGCACATGC‑3’；(2)用琼脂糖凝胶电泳检测步骤(1)中PCR扩增产物片段大小；(3)用变性剂处理步骤(1)中PCR扩增产物之后，再对变性后的扩增片段进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据聚丙烯酰胺凝胶电泳结果鉴定黄牛GLI3基因第8143位的单核苷酸多态性。