一种直接鉴定高等植物DNA同源重组的方法

摘要

本发明公开了一种直接鉴定高等植物DNA同源重组的方法，包括：(1)以待鉴定的植物为母本，诱导胚囊染色体加倍获得2n雌配子；(2)2n雌配子与父本植物雄配子杂交获得杂种三倍体；(2)筛选获得共显性分子标记引物；(3)以筛选的共显性分子标记引物进行PCR扩增；(4)扩增产物进行毛细管电泳分析：如果三倍体扩增产物中只出现母本的共显性分子标记之一，表明在该分子标记相关位点未发生同源重组；如果三倍体扩增产物中出现了母本的全部遗传信息，表明待鉴定母本植物在该分子标记相关位点发生了同源重组并形成异源双链DNA。本发明方法对于植物遗传分析、分子标记技术方法判别以及指导三倍体育种等具有重要的理论和应用价值。

主权项

一种直接鉴定杨属植物DNA同源重组的方法，包括以下步骤：（1）以待鉴定的杨属植物为母本，施加理化处理诱导胚囊染色体加倍获得两条姊妹染色体共存于同一配子的2n雌配子；（2）用2n雌配子与父本植物的雄配子杂交获得杂种三倍体材料；（2）筛选获得父母本有差异且母本杂合的共显性分子标记引物；（3）提取母本以及杂种三倍体材料的DNA为扩增模板，以筛选的共显性分子标记引物作为PCR扩增引物，分别进行PCR扩增；（4）将扩增产物分别进行毛细管电泳分析：如果杂种三倍体材料的扩增产物中只出现母本的共显性分子标记的其中之一，表明在该分子标记相关位点未发生同源重组；如果杂种三倍体材料的扩增产物中出现了母本的全部遗传信息，则说明待鉴定的母本植物在该分子标记相关位点发生了同源重组并形成异源双链DNA，其中，在母本大孢子发育过程中处于单核胚囊时期向二核胚囊发育之间，即胚囊第一次有丝分裂时期，施加所述的理化处理。