利用蛋白质分子标记选择高解舒性状家蚕茧的方法

摘要

本发明涉及家蚕辅助育种选育技术，旨在提供一种利用蛋白质分子标记选择高解舒性状家蚕茧的方法。该方法包括：(1)制备SDSPAGE凝胶，凝胶上设加样孔；(2)在种茧上剪取茧层，加入含有尿素、巯基乙醇、SDS的水溶液，80℃水浴处理；吸取上样进行电泳；(3)将电泳凝胶与染色液一起放入密闭容器内，60℃温育后水洗凝胶，加入脱色液振荡，更换脱色液再振荡；(4)凡是在电泳结果中显示110kDa蛋白条带的，即是有Sericin2蛋白质分子标记的样品个体。用丝胶蛋白质Sericin2为分子标记，可以准确有效的选择高解舒个体，从而大幅度的改进家蚕茧解舒性状，提高育种效率。只要有标记蛋白质Sericin2存在的个体，其蚕茧解舒率就在90％以上，选种个体饲养规模可以减少30～50％。

主权项

一种利用蛋白质分子标记选择高解舒性状家蚕茧的方法，包括以下步骤：(1)制备丙烯酰胺浓度为T％＝5％、C％＝2.6％和尺寸为8×8×0.1cm3的SDS‑PAGE凝胶，凝胶上设加样孔；(2)在待测种茧样品上剪取10mg茧层，加入300μL含有48％(m/v)尿素、4％(v/v)巯基乙醇、4％(m/v)SDS的水溶液，80℃水浴处理5～15min；吸取2μL上样，以20mA/gel进行电泳，持续20min后结束；(3)将电泳凝胶与50mL经60℃预热的染色液一起放入密闭容器内，将容器浸入60℃水浴中；温育15min后，将染色液倒出，水洗凝胶一遍，加入经60℃预热的脱色液，振荡10min，更换脱色液再振荡10min；所述染色液含有0.1％(m/v)考马斯亮蓝R250、10％(v/v)乙酸和20％(v/v)乙醇，余量为水；所述脱色液含5％(v/v)乙酸和10％(v/v)乙醇，余量为水；(4)凡是在电泳结果中显示110kDa蛋白条带的，即是有Sericin2蛋白质分子标记的样品个体。