可降解棉籽壳的复合酶及其以果胶诱导的制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种可降解棉籽壳的复合酶及其以果胶诱导的制备方法和应用，该复合酶组分包括：纤维素酶、木聚糖酶和果胶酶活力；其制备方法，包括：将里氏木霉种子接种到种子培养基于25～30℃，120～250r/min条件下培养24～48小时，以4～10％接种量转接至含1～5％果胶的发酵培养基产酶，培养过程中可以通过添加果胶进一步诱导产酶，在25～30℃，120～250r/min条件下培养4～8天，过滤，离心得粗酶。本发明制得的复合酶具有较高的酶活、更适合棉籽壳降解的复合酶体系，而且安全环保，操作简单，可控性强，相比常规的碱处理反应条件温和，对环境友好，具有良好的应用前景。

主权项

一种可降解棉籽壳的复合酶，所述的复合酶由以下方法制得，包括：将里氏木霉种子接种到种子培养基于25～30℃，120～250r/min条件下培养24～48小时，以4～10%接种量转接至含1～5%果胶的发酵培养基产酶，培养过程中通过添加相对发酵培养基1～2%的果胶进一步诱导产酶，在25～30℃，120～250r/min条件下培养4～8天，过滤，离心得粗酶液；其中，种子培养基包含：1%葡萄糖，0.1～1%蛋白胨，0.05%柠檬酸，0.015%Tween 80，2%Vogel’s mediumN的Vogel培养基，pH5.0；或者是包含1%葡萄糖，0.1～1%蛋白胨，终浓度为0.05M的柠檬酸缓冲液，0.015%Tween 80，0.14%(NH4)2SO4，0.2%KH2PO4，0.03%尿素，0.04%CaCl2·2H2O，0.03%MgSO4·7H2O，0.0005%FeSO4·7H2O，0.00016%MnSO4·H2O，0.00014%ZnSO4·7H2O，0.00037%CoCl2·6H2O的Mandels培养基，pH4.8‑5.0；发酵培养基包含：0.1～1%葡萄糖，0.1～1%蛋白胨，0.05%柠檬酸，0.015%Tween 80，2%Vogel’s mediumN，添加1～5%果胶，pH5.0；或者是含0.1～1%葡萄糖，0.1～1%蛋白胨，终浓度为0.05M的柠檬酸缓冲液，0.015%Tween 80，0.14%(NH4)2SO4，0.2%KH2PO4，0.03%尿素，0.04%CaCl2·2H2O，0.03%MgSO4·7H2O，0.0005%FeSO4·7H2O，0.00016%MnSO4·H2O，0.00014%ZnSO4·7H2O，0.00037%CoCl2·6H2O的Mandels培养基，添加1～5%果胶，pH4.8‑5.0。