发明名称 |
一种植物RNA的提取工艺 |
摘要 |
一种植物RNA的提取工艺属于化工技术领域,更具体地说,是涉及一种植物RNA的提取工艺。本发明提供了一种操作简单、反应条件温和的植物RNA的提取工艺。本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β-巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。 |
申请公布号 |
CN103013978A |
申请公布日期 |
2013.04.03 |
申请号 |
CN201110288815.0 |
申请日期 |
2011.09.27 |
申请人 |
苏兆明 |
发明人 |
苏兆明 |
分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/10(2006.01)I |
代理机构 |
|
代理人 |
|
主权项 |
一种植物RNA的提取工艺,其特征在于,本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH 7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β‑巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;吸取上清液转入另一个离心管中,加入预冷的异丙醇,在‑10~‑20℃下沉淀1.5h;离心,弃上清液,倒置空干,加入70~80%的乙醇,悬浮沉淀;离心,弃上清液,加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。 |
地址 |
110179 辽宁省沈阳市浑南新区世纪路3号同方世纪城B座928室 |