发明名称 一种植物RNA的提取工艺
摘要 一种植物RNA的提取工艺属于化工技术领域,更具体地说,是涉及一种植物RNA的提取工艺。本发明提供了一种操作简单、反应条件温和的植物RNA的提取工艺。本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β-巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。
申请公布号 CN103013978A 申请公布日期 2013.04.03
申请号 CN201110288815.0 申请日期 2011.09.27
申请人 苏兆明 发明人 苏兆明
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种植物RNA的提取工艺,其特征在于,本发明采用如下技术方案,工艺步骤为:RNA提取缓冲液的成分有:异硫氰酸胍2~4mol/L、柠檬酸钠(pH 7.0)25~35mmol/L、十二烷基肌氨酸钠0.5~1.0%(W/V)、β‑巯基乙醇2~4%(V/V);取预冷的提取缓冲液加入到离心管中,置于冰上;取霸王叶片、根系在装有过量液氮的研钵中充分研磨,用预冷的药匙将霸王叶片、根系粉末转入离心管中,剧烈震荡10min,冰上静置5min;加入醋酸钠、水饱和酚、体积比为20∶1~24∶1的氯仿和异戊醇混合溶液,摇匀,离心20min;吸取上清液转入另一个离心管中,加入预冷的异丙醇,在‑10~‑20℃下沉淀1.5h;离心,弃上清液,倒置空干,加入70~80%的乙醇,悬浮沉淀;离心,弃上清液,加入70~80%的乙醇,洗涤RNA沉淀,室温下干燥10min,即得成品。
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