主权项 |
一种利用废弃棉织物制备细菌纤维素的方法,包括:(1)棉织物的酶解反应棉织物的离子液体预处理:将棉织物剪切为小块,以1%‑20%(w/w)的比例加入到离子液体中,于90℃‑130℃处理15min‑10h,静置冷却;其中,离子液体为(AMIM)Cl;离子液体/棉织物混合液再生:加入与离子液体5‑10倍体积的去离子水,搅拌再生,然后离心或者过滤,再用去离子水洗涤得到的沉淀或滤渣,直至上清或者滤液至无色;同时,将离心得到的上清液或者过滤得到的滤液置于蒸馏瓶中,在温度100‑170℃下常压蒸馏或者在温度50‑150℃和‑0.09~‑0.1Mpa的真空度条件下减压蒸馏,去除与离子液体共混的水,蒸馏至蒸不出水为止,蒸馏瓶中剩余的即为回收的离子液体;其中,蒸馏过程中冷凝管所用冷却液为10℃以下的冷却液,连接真空泵前的系统中加装一个冷阱,冷阱置于盛有液氮冷却剂的保温瓶中;酶解:向上述沉淀或滤渣中加入缓冲溶液至固液比为0.005g:1ml~1g:10ml,再加入纤维素酶至终浓度为5‑1000U/mL,调节pH至4.0‑5.5,在40‑60℃条件下反应1‑24h,离心或者过滤分离未降解棉织物和酶解液,将酶解液于4℃冷藏;(2)酶解液制备细菌纤维素将上述制备的酶解液直接作为培养细菌纤维素的培养基,加入相对酶解液0.1‑1%(w/v)的酵母膏和0.1‑0.5%(w/v)的胰蛋白胨,配制成培养基,再加入6%‑10%细菌纤维素生产菌的种子液,25‑30℃静置培养8‑28天得到细菌纤维素;或将步骤(1)中制得的酶解液用Ca(OH)2调酶解液pH到9.5‑11.0,25℃‑60℃水浴里脱毒反应12h‑24h,然后过滤并微调pH至4.5‑5.0,加入活性炭室温下搅拌反应5‑10min,过滤得到脱毒处理的酶解液;将脱毒处理的酶解液作为培养细菌纤维素的培养基,加入相对酶解液0.1‑1%(w/v)的酵母膏和0.1‑0.5%(w/v)的胰蛋白胨,配制成培养基,再加入6%‑10%细菌纤维素生产菌的种子液,25‑30℃静置培养8‑28天得到细菌纤维素;其中,细菌纤维素生产菌为醋酸杆菌、葡萄糖酸杆菌或红茶菌。 |