一种培育转基因植物的方法

摘要

本发明公开了一种培育转基因植物的方法，是将含有外源DNA的重组双元细菌人工染色体导入农杆菌中，得到重组农杆菌，将所得到的重组农杆菌用如下溶液进行悬浮后，转化目的植物：溶剂为水，溶质是非离子表面活性剂壬基酚聚氧乙烯醚或Sillwet L-77和蔗糖；其中，壬基酚聚氧乙烯醚或Sillwet L-77的体积百分比浓度为0.05％-0.1％，蔗糖的质量百分比浓度为5％。利用本发明的方法能将高达75kb的外源DNA片段导入目的植物中，这使与耐逆相关(特别是耐盐相关)的基因簇转入目的植物的可能性大大提高，为耐盐植物的培育奠定了技术基础。

主权项

一种培育转基因植物的方法，是将含有外源DNA的重组双元细菌人工染色体文库导入农杆菌中，得到重组农杆菌，将所得到的重组农杆菌用如下溶液进行悬浮后，转化目的植物，得到转基因植物；所述溶液的溶剂为水，溶质是壬基酚聚氧乙烯醚或Sillwet L‑77和蔗糖；所述壬基酚聚氧乙烯醚或Sillwet L‑77的体积百分比浓度为0.05％‑0.1％，所述蔗糖的质量百分比浓度为5％；所述外源DNA来自小盐芥的基因组DNA，其长度为50‑100kb；所述转化目的植物是将目的植物的整个花序浸泡于菌体悬浮液中；所述目的植物为拟南芥；所述方法还包括如下耐盐筛选步骤：在转基因拟南芥的抽薹期，依次用50mM NaCl、100mM NaCl和200mM NaCl处理植株的根系，其中，所述50mM NaCl的处理时间为3天，所述100mM NaCl的处理时间为3天，所述200mM NaCl的处理时间为3天。