发明名称 |
一种规模化生产人α1-抗胰蛋白酶的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种规模化生产人α1-抗胰蛋白酶的方法,具体涉及从人血浆分离的组分IV-1中纯化α1-抗胰蛋白酶。本发明包括以下步骤:采用低温乙醇法制得血浆沉淀IV-1;将沉淀IV-1溶解于缓冲液中,加入冷乙醇沉淀,过滤,取上清A;上清A进行S/D病毒灭活;然后加入PEG沉淀,得到上清B,过滤,分别进行DEAE Sepharose fast flow离子交换层析,DEAE Sepharose CL 6B层析,洗涤,洗脱,收集洗脱液,超滤透析,巴氏灭活,除菌过滤,分装,冻干,得到α1-抗胰蛋白酶粉末。本发明所生产的人α1-抗胰蛋白酶不仅产率高、纯度高,制品的比活也比较高,而且还可以进行工业化、规模化生产。 |
申请公布号 |
CN102180966B |
申请公布日期 |
2013.04.03 |
申请号 |
CN201110030791.9 |
申请日期 |
2011.01.28 |
申请人 |
哈尔滨派斯菲科生物制药股份有限公司 |
发明人 |
杨莉;李常禄;孙晓东;杨金平;陈凤珠;于洋;郭晶 |
分类号 |
C07K14/81(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
主分类号 |
C07K14/81(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种规模化生产人α1‑抗胰蛋白酶的方法,包括如下步骤: (a)采用低温乙醇法制得血浆沉淀IV‑1; (b)沉淀IV‑1用缓冲液溶解; (c)加入冷乙醇沉淀,所加的冷乙醇至乙醇浓度为8%~12%,调整pH5.2~5.6,搅拌,离心,离心液用滤器过滤,取上清A; (d)上清A溶液进行S/D病毒灭活,然后用PEG沉淀,取上清B; (e)上清B用滤器过滤,过滤液用DEAE Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析; (f)收集的蛋白液再经DEAE Sepharose CL 6B离子交换层析; (g)收集洗脱液,超滤,透析,巴氏灭活,除菌过滤,分装,冻干,得到α1‑抗胰蛋白酶粉末。 |
地址 |
150078 黑龙江省哈尔滨市道里区机场路640号 |