发明名称 一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用
摘要 本发明公开了一种植物乳杆菌定量检测方法及其检测试剂盒和应用。该植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)定量检测方法包括:(1)提取待检样品的总RNA;(2)将提取的总RNA反转录成cDNA;(3)采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对,以所得cDNA为模板,进行荧光定量PCR扩增,其中上游引物序列如SEQ ID No:1所示;下游引物序列如SEQ ID No:2所示;(4)通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定其中植物乳杆菌数量。本方法能够有效排除其他细菌,尤其是近缘菌的干扰,只检测样品中存活的植物乳杆菌数量。本发明所述植物乳杆菌定量检测试剂盒使用简便,检测效率高。
申请公布号 CN102994644A 申请公布日期 2013.03.27
申请号 CN201210594264.5 申请日期 2012.12.31
申请人 光明乳业股份有限公司 发明人 陈臣;任婧;周方方;艾连中
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/25(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人 朱水平;沈利
主权项 一种植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)定量检测方法,其特征在于,所述植物乳杆菌定量检测方法包括以下步骤:(1)提取待检样品的总RNA;(2)将步骤(1)提取的总RNA反转录成cDNA;(3)采用特异性扩增植物乳杆菌的引物对,以步骤(2)所得cDNA为模板,进行荧光定量PCR扩增检测,其中所述特异性扩增植物乳杆菌的引物对为:上游检测引物,其序列如序列表中SEQ ID No:1所示;下游检测引物,其序列如序列表中SEQ ID No:2所示;(4)通过比较待检样品的Ct值和定量外标准品的标准曲线测定样品中植物乳杆菌的数量。
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