体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型及其构建方法与应用

摘要

本发明公开了一种体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型及其构建方法与应用。其构建方法包括以下步骤：1)载体构建：构建包括HBV启动子、报告基因和HBV全基因组的重组表达载体；2)将步骤1)构建的重组表达载体转染到小鼠体内，得到体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型。本发明建立了一种简便易行，稳定可重复的可视化小鼠模型，该模型可用于监测HBV特异性CTLs的杀伤性和非杀伤性功能。此外，本发明用成年小鼠采用水动力转染方法建立小鼠模型，不需要特殊仪器，具有研究周期短、花费小、目的基因在肝脏特异长期稳定表达，且具有表达量高等优点，应用前景广阔。

主权项

一种体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型的构建方法，包括以下步骤：1)载体构建：构建包括HBV启动子cp、荧光素酶报告基因Fluc和1.2倍HBV全基因组的重组表达载体；用于构建重组表达载体的出发载体为真核表达载体pGL3；以pGL3为出发载体，构建的携带HBV启动子、Fluc报告基因和HBV全基因组的重组表达载体为pGL3‑CP‑Fluc‑HBV1.2，其序列如序列表中序列1所示；2)将步骤1)构建的重组表达载体以水动力转化法转染到雄性分型为H‑2d的BALB/c小鼠或分型为H‑2b的C57BL/6小鼠体内，得到体内监测HBV特异性CTLs功能的报告基因标记的小鼠模型。