一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的工艺

摘要

一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的工艺，其包括以下步骤：（1）发酵液预处理；（2）加入高介电常数极性有机溶剂浸泡提取多杀菌素，进行固液分离，收集浸提清液；（3）通过真空浓缩，挥发除去高介电常数极性溶剂，得到多杀菌素浓缩液；（4）加入低介电常数或高碳醇萃取溶媒进行萃取，得到负载有机相；（5）负载有机相中加入酸水进行反萃取，收集反萃取相；（6）挥发除去反萃取相中残留的萃取溶媒，用NaOH溶液调节pH值=8.5~11.5，使多杀菌素沉淀，过滤，用稀碱液将多杀菌素沉淀洗涤1~3次，真空干燥，即得到多杀菌素粉剂。本发明总收率可达80%以上，具有收率高、质量好、成本低、易于工业化等优点。

主权项

一种从刺糖多孢菌发酵液中提取多杀菌素的工艺，其特征在于，包括以下步骤：（1）发酵液预处理：发酵结束后放罐前，加入3~5 mol/L的氢氧化钠溶液，调节发酵液pH=8.0~11.0，然后将发酵液加热升温至60~80°C，保温并以300‑800r/min速度搅拌处理30~60 min；（2）浸泡提取：预处理后的发酵液冷却至室温后，按发酵液与极性有机溶剂体积比=1:0.5~2加入高介电常数极性有机溶剂，在10~40°C条件下浸泡、搅拌提取4~20小时，得到多杀菌素浸提液；多杀菌素浸提液用固液分离技术处理，弃去菌体固形物沉淀，收集浸提清液；（3）将浸提清液转入旋转蒸发仪或真空浓缩罐中，在40~50°C条件下，通过真空浓缩，将发酵液中的高介电常数极性溶剂挥发除去，得到多杀菌素浓缩液；（4）在多杀菌素浓缩液中加入低介电常数或高碳醇类萃取溶媒进行萃取，萃取条件为：萃取溶媒与多杀菌素浓缩液体积比=1:1~5，温度20~45°C，pH=7.0~11.0，萃取时间3~10min；萃取完成分层后，收集负载有机相；（5）向负载有机相中加入酸水进行反萃取，反萃取条件为：负载有机相与酸水体积比=1~5:1，酸水浓度0.1~0.4 mol/L，温度10~30°C，反萃取时间1~5 min，反萃取级数为1~5；反萃取分层完成后收集反萃取相；（6）用真空浓缩法或吹气法除去反萃取相中残留的萃取溶媒，用 NaOH溶液调节pH值=8.5~11.5，使多杀菌素以结晶形式沉淀出来，过滤，用pH=9.0~11.0的稀碱溶液将多杀菌素沉淀洗涤1~3次，真空干燥，即得到多杀菌素粉剂；第（2）步中，所述高介电常数极性溶剂为甲醇；第（4）步中，所述低介电常数萃取溶媒为乙酸丁酯；所述高碳醇萃取溶媒为正辛醇；第（5）步中，所述反萃取用酸水为草酸水溶液。