一种基于可视芯片的检测食品过敏原的方法

摘要

本发明公开了一种检测样品中多个过敏原的方法，包括：制备可视薄膜传感器芯片，其中在同一个芯片基质表面上分别固定对应于多个过敏原DNA序列的多个特异性探针；利用对应于多个过敏原DNA序列的多对特异性上游引物和下游引物对检测样品的DNA序列进行多重PCR扩增，其中下游引物的5’端带有共价结合的生物素；将步骤(2)的PCR扩增产物与可视化芯片上的探针进行杂交，并洗涤；用辣根过氧化酶标记的生物素抗体与芯片进行杂交，并洗脱未杂交的链；用辣根过氧化物酶的底物对芯片进行处理和显色；根据是否产生可视信号以及产生的可视信号对应的探针位置，确定检测样品中是否含有过敏原以及含有过敏原的种类。本发明的方法能快速、高通量且能同时检测样品中是否存在多种过敏原。

主权项

一种检测样品中多个过敏原的检测方法，包括：(1)制备可视薄膜传感器芯片，其中在同一个芯片基质表面上分别固定对应于多个过敏原DNA序列的多个特异性探针；(2)利用对应于多个过敏原DNA序列的多对特异性上游引物和下游引物对检测样品的DNA序列进行多重PCR扩增，其中下游引物的5’端带有共价结合的生物素；(3)将步骤(2)的PCR扩增产物与可视化芯片上的探针进行杂交，并洗涤；(4)用辣根过氧化酶标记的生物素抗体与芯片进行杂交，并洗脱未杂交的链；(5)用辣根过氧化物酶的底物对芯片进行处理和显色；(6)根据是否产生可视信号以及产生的可视信号对应的探针位置，确定检测样品中是否含有过敏原以及含有过敏原的种类，其中，所述过敏原选自大豆、花生、小麦、腰果、鸡蛋、牛奶、鱼和虾，分别对应于该8种过敏原的DNA序列的8种特异性探针为：SEQ ID NO：3、6、9、12、15、18、21、24，对应于所述8种过敏原的DNA序列的8对特异性上游引物和下游引物分别为：SEQ ID NO：1‑2、4‑5、7‑8、10‑11、13‑14、16‑17、19‑20、22‑23。