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一种猪精液颗粒冷冻保存稀释和冷冻方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)、采精：收集猪浓份精液，选择无异味，色泽乳白色，精子形态正常，活力在0.7以上、密度大于1×109个/毫升的精液；(2)、配制冷冻保护稀释液：基础液的配方为：葡萄糖8～10g、EDTA 0.1～0.2g、双蒸水100ml；冷冻保护稀释液的配方为：3％甘油、0.5％乙二醇、0.1～0.2mg/ml的ATP、20％的卵黄。(3)、稀释：将步骤(2)得到的冷冻保护稀释液加热到37℃，并按1∶1的比例加入到步骤(1)得到的精液中，缓缓摇匀使精液稀释；(4)、平衡：将步骤(3)得到的稀释精液平衡3～4小时，平衡后镜检精子的活力；(5)、冷冻：在冷冻盒中倒入液氮，待盒上筛网温度降至‑135℃时，进行快速滴冻；滴冻完毕后，盖上保温板保温，然后将颗粒直接投入液氮；(6)、解冻：事先准备两种温度的解冻水浴，先将冷冻颗粒从液氮中取出，迅速投入处于第一种温度水浴中的铝盒内，待其即将融化完时取出铝盒，再放入第二种温度的水浴中，融化后的精液以备检测；(7)、检测：用常规的方法检测冻后精液的各项指标。 |
