主权项 |
一种应用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)取200~300目的硅胶,加入氯仿搅拌,置于超声振荡器中振荡至没有气泡后倒入层析柱中装柱,得到硅胶柱;(2)将元胡的乙醇粗提物用少量氯仿、甲醇体积比为50:1混合的溶剂溶解,制成供试品溶液,取供试品溶液作为样品溶液上样,使样品溶液完全吸附于硅胶上,所述样品溶液中元胡的乙醇粗提物与硅胶柱中硅胶的质量比为1:30~105,依次用氯仿、甲醇体积比为50:1的洗脱剂洗脱150~250min,氯仿、甲醇体积比40:1的洗脱剂洗脱150~250min,氯仿、甲醇体积比30:1 的洗脱剂洗脱至薄层层析跟踪检测至洗脱液中无去氢紫堇碱组分,洗脱剂流速为1.6~2.5ml/min,等体积收集洗脱液,将收集得到的洗脱液用薄层层析与高效液相色谱进行检测,合并与去氢紫堇碱标准品Rf值及保留时间相同且去氢紫堇碱纯度大于90%的洗脱液,用旋转蒸发仪回收溶剂,得到去氢紫堇碱粗品;所述元胡的乙醇粗提物按如下方法制得:取元胡药材粉碎,用60~98%乙醇回流提取1~5次,合并各次的提取液,抽滤后滤液减压浓缩至浸膏状,用酸溶液调pH值为2~3,静置10~30小时,取上清液过滤除去沉淀;滤液用氯仿萃取1~5次,收集合并氯仿层,旋转蒸发回收氯仿,得元胡的乙醇粗提物;(3)步骤(2)得到的去氢紫堇碱粗品除色素后用甲醇或氯仿结晶,得到去氢紫堇碱纯品。 |