IgG抗体在聚苯乙烯载体表面的立体定向固定方法

摘要

本发明公开了一种IgG抗体立体定向固定技术，可实现聚苯乙烯载体表面所固定IgG抗体是均一、Fab段充分暴露及保持高抗原结合活性的IgG抗体，能有效提高固相免疫分析的灵敏性、特异性与稳定性。本发明构建的IgG抗体特异性立体定向固定具体技术如下：利用化学修饰方法在聚苯乙烯表面接入“金属离子手臂”，并以基因工程技术构建表达带Histag的ZZ亲和肽，基于Histag与金属离子亲和特性介导ZZ亲和肽定向固定在聚苯乙烯表面，进而发挥ZZ亲和肽免疫学性质，特异性结合IgG抗体的Fc段，获得生物亲和模式的金属离子–(ZZ-His)–Fc组装体，实现IgG抗体Fab端的立体定向固定。

主权项

一种IgG抗体在聚苯乙烯（PS）载体表面的立体定向固定方法，其特征在于：包括以下步骤：首先，利用化学修饰方法在PS 载体表面接入金属离子功能手臂，并以基因工程技术构建表达C端带His tag的ZZ‑His亲和肽，然后利用His tag 与金属离子亲和的特性介导ZZ‑His亲和肽定向固定在PS 表面，进而利用ZZ‑His亲和肽的免疫学性质，特异性结合IgG抗体的Fc 段，从而获得生物亲和模式的金属离子–(ZZ‑His)–Fc组装体； 所述金属离子为Ni2+、Cu2+或Fe3+。