一种蝇蛆甲壳素、壳聚糖的制备工艺

摘要

本发明公开了一种蝇蛆甲壳素、壳聚糖的制备工艺及蝇蛆甲壳素在诱导深绿木霉T2菌株产生几丁质酶中的应用，属于生物技术领域。其中蝇蛆甲壳素的制备工艺主要是将传统的盐酸除钙工艺改为EDTA除钙，减少了废酸排放的环境污染，避免了浓酸对甲壳素分子链的破坏，获得了高品质的甲壳素产品；在蝇蛆壳聚糖的制备工艺中，将高温浓碱回流4h的传统工艺改为氢氧化钠-戊醇反应体系，并采用微波加热处理两次，提高了碱液利用率，极大的缩短了反应时间，节约了能源消耗，获得了含水量低，脱乙酰度较高的白色粉末状壳聚糖产品。本发明的蝇蛆甲壳素还可以作为碳源，诱导深绿木霉T2菌株产生几丁质酶，其诱导效果显著。

主权项

一种利用蝇蛆甲壳素制备壳聚糖的工艺，其中，所述蝇蛆甲壳素的制备是以蝇蛆为原料制成粉体，经EDTA除钙、除蛋白质、氧化及还原处理后制得甲壳素，具体包括如下步骤：（1）原料预处理：将干蝇蛆粉碎，用水冲洗，洗去大量的蛋白质成分，将剩余蛆皮过滤收集备用；（2）EDTA除钙：称取步骤（1）制得的清洁、干燥的蝇蛆蛆皮，用饱和EDTA溶液浸泡20～30h，除去钙质，后过滤除去EDTA，并将蛆皮用水洗至中性；（3）稀碱除蛋白质：将步骤（2）处理过的蛆皮再用8～12% NaOH水溶液，沸水浴1.5～3h，以水解蛋白质，加热期间不断搅拌，且期间至少更换4次碱液，加热结束，除去碱液，水洗至中性，得到甲壳素粗品；（4）精制制得成品：将步骤（3）制得的甲壳素粗品，用0.3～0.8% KMnO4水溶液浸渍氧化20～60min，水洗除尽KMnO4后，再用0.5～1.5%草酸水溶液于60～70℃下，搅拌进行脱色反应待产物变白为止，将产物水洗至中性，阴干，得白色片状甲壳素；其特征在于，包括如下步骤：    （1）脱乙酰反应    将精制的蝇蛆甲壳素与35～45%的NaOH‑戊醇溶液混合均匀，置于700～900W微波炉中，以95%功率的微波条件进行脱乙酰反应，处理2次，每次2～3min，中途过滤更换NaOH‑戊醇混合液一次；    （2）稀酸溶解    步骤(1)的反应结束后，用热水洗涤产物至中性，再用甲醇浸泡洗涤后，将湿品溶于4～6%醋酸溶液中，过滤除去不溶物；    （3）制得成品    将步骤（2）制得的产物再用8～12%的NaOH溶液中和，析出胶体物，离心洗涤至中性，真空干燥，研细，得到白色壳聚糖粉末。