发明名称 一种体外扩增γδT细胞的方法
摘要 本发明涉及γδT细胞培养方法,具体涉及一种体外扩增γδT细胞的方法,该方法的操作步骤如下:抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶,备用。分离患者外周血单个核细胞(PBMC),用含5%自体血浆的无血清培养基将PBMC浓度调整为1×106 /ml,再将PBMC细胞悬液转入T75培养瓶中,加入含有适当浓度Zoledronat,HSP70,IL-2,IL-7,IL-15的初始培养基,37℃、5%CO2的饱和湿润环境中培养,根据细胞的生长情况,每2~3天更换培养基,将细胞浓度控制在2.5×106 /ml左右,同时全量补充Zoledronat,HSP70,IL-2和IL-7,IL-15,持续培养12~16天后,即可获得大量较高纯度的γδT细胞。
申请公布号 CN102994448A 申请公布日期 2013.03.27
申请号 CN201210541657.X 申请日期 2012.12.13
申请人 上海柯莱逊生物技术有限公司 发明人 解尚云;叶永清;谭令兵
分类号 C12N5/0783(2010.01)I 主分类号 C12N5/0783(2010.01)I
代理机构 上海三方专利事务所 31127 代理人 吴干权;钱品兴
主权项 一种体外扩增γδT细胞的方法,其特征在于该方法由以下步骤组成:a.用抗TCRγδ抗体和CD28McAb预先包被T75培养瓶以备用,b.将外周血单个核细胞转入包被的T75培养瓶中,加入含有唑来膦酸、HSP70、IL‑7、IL‑15和IL‑2的无血清培养基,放入二氧化碳培养箱培养12~16天后获得大量较高纯度的γδT细胞。
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