测序反应中碱基的有效确定

摘要

本发明涉及核酸鉴定和检测的组合物及方法。本发明的组合物及方法包括从样品中提取靶核酸并进行片段化，利用片段化的靶核酸产生靶核酸模板并将这些靶核酸模板经扩增方法形成核酸纳米球。发明还涉及利用包括连接法测序的各种测序应用来检测和鉴定序列的方法。

主权项

鉴定靶序列中位于第一检测位点的第一核苷酸的方法，其中所述靶序列包含复数个检测位点，所述方法包括：a)提供表面，所述表面包含复数个固定在其上的多联体，其中每个多联体包含复数个单体，和每个单体包含：i)所述靶序列的第一靶结构域，包含第一检测位点，和ii)第一衔接子，其包含第一锚定位点；b)使第一锚定探针与所述第一锚定位点杂交；c)使第二锚定探针与靶序列区域杂交，所述靶序列区域位于第一锚定位点和靶结构域之间，并且与二者是连续的，其中第二锚定探针是完全简并的；d)使第一测序探针与所述第一靶结构域杂交，其中所述第一测序探针包含：i)与所述第一靶结构域互补的序列，其中所述序列包括位于询问位点的特异核苷酸，其中所述特异核苷酸与位于检测位点的核苷酸互补，和ii)鉴定位于询问位点的特异核苷酸的标记，e)连接所述锚定探针和所述测序探针以形成探针连接产物；和f)检测所述探针连接产物从而鉴定所述核苷酸。