发明名称 一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法
摘要 本发明涉及一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法,其包括以下步骤:一)黑根霉菌丝脂质体转化:1)将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨,得菌悬液,备用;2)将脂质体2000与质粒pEGFP-C1混匀,于-5-5℃放置15-60min,然后转入到菌悬液中,混匀,于-5-5℃放置15-60min;3)将步骤2)所得混合液涂抹PDA平板,25-30℃培养1-5天;二)传代培养:4)挑取步骤3)经荧光显微镜检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25-30℃培养1-5天,共传代培养5-8次。该方法简便、快捷、转化率高、转化子遗传稳定,不需要制备原生质体,不需要复杂装置。
申请公布号 CN102978233A 申请公布日期 2013.03.20
申请号 CN201210462778.5 申请日期 2012.11.16
申请人 河南农业大学 发明人 邱立友;孙强;崔继红;柴冉;高玉千;戚元成;申进文
分类号 C12N15/80(2006.01)I;C12R1/845(2006.01)N 主分类号 C12N15/80(2006.01)I
代理机构 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 代理人 时立新;杨海霞
主权项 一种黑根霉菌丝脂质体直接转化方法,其特征在于,包括以下步骤:一)黑根霉菌丝脂质体转化:1)将幼嫩黑根霉湿菌丝与甘露醇水溶液混合后研磨,得菌悬液,备用;2)将脂质体2000与质粒pEGFP‑C1混匀,于‑5-5℃放置15-60min,然后转入到菌悬液中,混匀,于‑5-5℃放置15-60min;3)将步骤2)所得混合液涂抹PDA平板,25-30℃培养1-5天;二)传代培养:4)挑取步骤3)经检测带有荧光的转化子接种于PDA平板上25-30℃培养1-5天,共传代培养5-8次。
地址 450002 河南省郑州市文化路95号