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一种农杆菌介导的玫瑰遗传转化方法，其特征在于，以玫瑰未成熟叶片诱导得到的体细胞胚为受体，通过农杆菌介导的方法，按下述步骤进行处理：（1）体细胞诱导：以玫瑰未展开带叶柄小叶为外植体，将其接种于体细胞胚诱导培养基中，直接诱导出体细胞胚；（2）转化受体的继代增殖培养：将诱导得到的体细胞胚接种于体细胞胚继代增殖培养基中继代增殖培养，为遗传转化提供转化受体材料；（3）遗传转化：将经继代增殖培养的体细胞胚作为转化受体材料转入制备好的农杆菌菌液中进行侵染，所述侵染时间为50‑60min，农杆菌菌液OD600值为0.1‑0.6；（4）然后将侵染后的体细胞胚进行共培养，选择增殖培养、选择萌发成苗培养，最终获得玫瑰的转基因植株，具体为：先将侵染后的体细胞胚转入共培养培养基中，在24±2℃、黑暗条件下进行共培养，共培养2天后转入体细胞胚选择增殖培养基在24±2℃、光照强度为50‑100lx条件下进行选择增殖培养10周，每2周更新一次培养基，筛选得到抗性体胚；将在选择增殖培养基中筛选得到的抗性体胚转入选择萌发成苗培养基中，每三周更新一次培养基，在24±2℃、光照强度为1000‑1500 lx下萌发成苗，最终获得玫瑰的转基因植株；其中，步骤（1）中所述体细胞胚诱导培养基包括：MS培养基为基础培养基，并添加2, 4‑D 3.0‑4.0mg/L、葡萄糖30.0g/L、GEL 3.0 mg/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0； 步骤（2）中所述体细胞胚继代增殖培养基包括：MS培养基为基础培养基，并添加2, 4‑D 1.0mg/L、葡萄糖30.0g/L、GEL 3.0 mg/L， 加蒸馏水至1L，pH 6.0，每4周更新一次培养基，并选择在更新的体细胞继代增殖培养基中培养了2周的体细胞胚作为遗传转化的受体；所述培养条件为：温度24±2℃、光照强度为50‑100lx； 步骤（4）中，所述共培养培养基包括：MS培养基为基本培养基、添加2, 4‑D 1.0mg/L，AS 100μmol/L，葡萄糖30.0g/L，GEL 3.0 mg/L，加蒸馏水至1L，pH 5.8；所述体细胞胚选择增殖培养基包括：MS培养基为基本培养基，并添加2, 4‑D 1.0mg/L，Km75‑100mg/L，Cef300mg/L，葡萄糖30.0g/L，GEL 3.0 mg/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0；所述选择萌发成苗培养基包括：1/2MS培养基为基本培养基，并添加BA1.0 mg/L，Km 75mg/L, Cef 300mg/L,葡萄糖30g/L，GEL 3.0 mg/L，加蒸馏水至1L，pH 6.0。 |
