一种制备抗凝血酶的方法

摘要

本发明提供了一种制备抗凝血酶的方法，它包括如下步骤：a.沉淀溶解；b.PEG沉淀；c.病毒灭活；e.调制；h.残留肝素吸附；i.病毒灭活；j.除菌分装，冻干。本发明采用化学稳定性更好的硬性硅胶基质（HeparinHyperD）进行肝素亲和层析，这种基质耐碱处理的能力更好，更适用于工业化生产的需要，发明人在纯化技术及病毒灭活去除方面均进行改进，并加以进行有机组合，以期进行血浆深度综合利用，提高AT-Ⅲ制剂的有效性及安全性，为临床治疗提供新的选择。

主权项

一种制备抗凝血酶的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a.沉淀溶解：取改良K‑N法组份Ⅳ沉淀溶解于8‑12倍体积的pH8.1‑9.0的缓冲液中，常温分散混悬搅拌1小时，30‑40℃加热搅拌1小时，再常温搅拌4‑14小时，得溶解液；b.PEG沉淀：将a步骤溶解液冷至5℃，加入PEG3000‑6000至浓度为6‑12%（g/ml），搅拌1小时，用酸调整pH值至5.95‑6.05，加入1.0‑2.0%助滤剂，搅拌过滤得到PEG上清液，上清液用碱调到pH7.35‑7.45；c、病毒灭活：S/D法；d、纯化：采用肝素亲和层析纯化；e、调制；f、纯化：采用肝素亲和层析纯化；g.超滤透析；h.残留肝素吸附；i.病毒灭活：15nm纳米过滤；j.除菌分装,冻干。