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<p>Método que comprende: (a) lisar células de un tumor mamario aislado tras la administración de un fármaco anticáncer, o previamente a laincubación con un fármaco anticáncer, para producir un extracto celular, (b) detectar un estado de activación de uno o más analitos en el extracto celular utilizando un ensayo quecomprende una pluralidad de series de dilución de anticuerpos de captura específicos de uno o más analitos, enel que los anticuerpos de captura se inmovilizan sobre un soporte sólido, y en el que el ensayo comprende: (i) incubar el extracto celular con una pluralidad de series de dilución de anticuerpos de captura para formaruna pluralidad de analitos capturados, (ii) incubar la pluralidad de analitos capturados con anticuerpos de detección que comprenden una pluralidadde anticuerpos independientes del estado de activación y una pluralidad de anticuerpos dependientes delestado de activación específicos para los analitos correspondientes con el fin de formar una pluralidad deanalitos capturados detectables, en el que los anticuerpos independientes de estado de activación se marcancon glucosidasa oxidasa, en el que la glucosa oxidasa y los anticuerpos independientes del estado deactivación se conjugan con una molécula de dextrano activada por sulfhidrilo, en el que los anticuerposdependientes del estado de activación se marcan con un primer miembro de una pareja de amplificación deseñales y en el que la glucosa oxidasa genera un agente oxidante que se canaliza y reacciona con el primermiembro de la pareja de amplificación de señales, (iii) incubar la pluralidad de analitos capturados detectables con un segundo miembro de la pareja deamplificación de señal para generar una señal amplificada, y (iv) detectar la señal amplificada generada a partir del primer y segundo miembros de la pareja deamplificación de señales, y (c) determinar si el fármaco anticáncer resulta adecuado o inadecuado para el tratamiento del tumor de mamamediante comparación del estado de activación detectado para uno o más analitos con un perfil de activación dereferencia generado en ausencia del fármaco anticáncer, en el que el método está destinado a la selección de unfármaco anticáncer adecuado para el tratamiento de un tumor de mama.</p> |
