发明名称 |
猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用 |
摘要 |
本发明公开了猪源启动子蛋白表达载体及其构建方法与应用。本发明表达载体为环状,包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒,所述外源基因表达盒自上游至下游依次由转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成;所述转录启动子是MLP6启动子。本发明表达载体可在猪类细胞中高效表达外源蛋白,因含有一个真核复制起点,可在表达T抗原的细胞中大量增值,从而提高蛋白表达水平。本发明利用同源重组构建表达外源基因的重组载体,避免了传统的酶切,连接等环节,比传统的连接过程省略了2-3个步骤。使用本发明载体构建表达外源基因的重组载体的过程简便、快速、经济、高效,可以快速完成大量外源基因的表达载体的构建。 |
申请公布号 |
CN101948872B |
申请公布日期 |
2013.03.20 |
申请号 |
CN201010261045.6 |
申请日期 |
2010.08.24 |
申请人 |
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
发明人 |
崔尚金;刘芹防;刘珊珊;张超范 |
分类号 |
C12N15/85(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/85(2006.01)I |
代理机构 |
北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 |
代理人 |
孙皓晨;余光军 |
主权项 |
一种环状的猪源启动子蛋白表达载体,包含原核复制起点、真核复制起点、筛选标记基因和外源基因表达盒,所述外源基因表达盒自上游至下游依次由一个转录启动子、连接片段和多聚腺苷酸加尾信号组成;所述转录启动子是Myosin light polypeptide 6启动子;所述的猪源启动子蛋白表达载体其碱基为SEQ ID NO:1所示。 |
地址 |
150001 黑龙江省哈尔滨市南岗区马端街427号 |