具有改善并稳定化的活性的固定化界面酶

摘要

本发明公开了一种通过以下步骤制备固定于不溶性载体上的界面酶的方法：提供由水性缓冲溶液和至少一种第一有机溶剂组成的双相体系；将所述界面酶与所提供的双相体系混合；将所述载体加入到所获得的混合物中并进行混合；从上一步所获得的混合物中分离出固定在所述载体上的界面酶而进行。所生成的酶被锁定在其催化活性构象，因而显示出改善的活性和稳定性。本发明还公开了所生成酶的应用，特别是在生物柴油的制备中的应用。

主权项

一种制备固定于不溶性多孔载体上的界面酶的方法，所述方法包括下列步骤：(a)提供由水性缓冲溶液和至少一种第一有机溶剂组成的双相体系，所述第一有机溶剂是能够在与水混合时形成双相的疏水性溶剂，其中，所述第一有机溶剂选自烷类、醇类、醛类和酮类以及它们的至少两种的任何混合物；(b)将所述界面酶与步骤(a)所提供的双相体系混合；(c)将所述载体加入到步骤(b)的混合物中并进行混合；(d)从步骤(c)所获得的混合物中分离出固定在所述载体上的界面酶；其中，在将所述载体加入到步骤(b)中获得的酶双相溶液之前，将所述载体用溶于第二有机溶剂中的表面活性剂处理，并在所述处理后将该溶剂蒸发，从而获得均匀地覆盖有表面活性剂的载体，所述第二有机溶剂是能够使所述表面活性剂溶解的有机溶剂，所述第二有机溶剂选自烷类、醚类、酮类和醇类以及它们的至少两种的任何混合物，并且其中，所述界面酶是脂肪酶或磷脂酶。