大叶藻微卫星标记及其筛选方法和应用

摘要

本发明属于分子生物学DNA标记技术与应用领域，特别涉及大叶藻微卫星标记及其筛选方法和应用。本发明提出一组适于大叶藻品种分类、遗传关系鉴定的微卫星标记；相应的，本发明还提供该组大叶藻微卫星标记的筛选方法，以及利用该组大叶藻微卫星标记对大叶藻基因型进行检测的方法。应用本发明的检测方法进行检测，对每对引物的PCR扩增产物进行分析，分辨准确率达100％；说明本发明的4个微卫星标记能用于大叶藻的品种分类、遗传关系鉴定；该检测方法简单易行，检验结果准确；通过简单水面采集叶片和实验室PCR检测鉴别大叶藻与丛生大叶藻样品，取代了繁重的潜水作业。

主权项

利用大叶藻微卫星标记对大叶藻和丛生大叶藻进行鉴别的方法，其特征在于：进行鉴别的步骤如下：首先提取大叶藻和丛生大叶藻基因组DNA并稀释备用；再利用大叶藻中含有的微卫星核心序列，使用特异性引物对大叶藻和丛生大叶藻的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行凝胶电泳检测，其中所述的大叶藻微卫星标记的特异性引物为：核苷酸序列SEQ ID NO：1中微卫星核心序列的特异性引物为：F：CGAACATGAATCTCCGAACC，R：GGTAAATGCACCCAGCTCTC；核苷酸序列SEQ ID NO：2中微卫星核心序列的特异性引物为：F：CCCCATCTTTTGAGTTTGGA，R：TCATCATTTCTTGCAATTTGAATC；核苷酸序列SEQ ID NO：3中微卫星核心序列的特异性引物为：F：CATTCCATTCAAGAGCAGCA，R：CAACAAATCAATCAATCATTCACTC；核苷酸序列SEQ ID NO：4中微卫星核心序列的特异性引物为：F：AATCTGTTGCCACGAAGGAG，R：TCACCTTCATCAAGCAGTCG。