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一种测定碱性蛋白酶活力的酶谱方法，包括凝胶配制步骤和电泳步骤，其特征在于电泳用聚丙烯酰胺凝胶由两种不同组分配比的聚丙烯酰胺凝胶组成：a. 聚丙烯酰胺凝胶I由7质量份丙烯酰胺混合溶液I和1质量份浓缩胶缓冲液组成，其中：（1）丙烯酰胺混合溶液I由丙烯酰胺、过硫酸铵、N,N,N′,N′‑四甲基二乙胺（TEMED）和超纯水组成，该溶液中丙烯酰胺质量体积比为6.67%、过硫酸铵质量体积比0.133%、N,N,N′,N′‑四甲基二乙胺（TEMED）质量体积比0.133%；（2）浓缩胶缓冲液由氢氧化钾、冰乙酸和超纯水组成，该溶液中氢氧化钾质量体积比为2.7%，冰乙酸体积比为2.87% ，pH6.7；b. 聚丙烯酰胺凝胶II由7质量份丙烯酰胺混合溶液II和1质量份分离胶缓冲液组成，其中：（1）丙烯酰胺混合溶液II由丙烯酰胺、明胶、过硫酸铵、N,N,N′,N′‑四甲基二乙胺（TEMED）和超纯水组成，该溶液中丙烯酰胺质量体积比为13.33%、过硫酸铵质量体积比0.133%、N,N,N′,N′‑四甲基二乙胺（TEMED）质量体积比0.133%、明胶质量体积比0.133%；（2）分离胶缓冲液由氢氧化钾、冰乙酸和超纯水组成，该溶液中氢氧化钾质量体积比为2.7%，冰乙酸体积比为17.2% ，pH4.3； c. 上述两种聚丙烯酰胺凝胶分别配制完成后，按照体积比聚丙烯酰胺凝胶I：聚丙烯酰胺凝胶II=2:5，用于制备电泳用聚丙烯酰胺凝胶；样品缓冲液中含有质量体积比为1%的十六烷基三甲基，体积比为25%的甘油，质量体积比为0.002％甲基绿，体积比为12.5% 浓缩胶缓冲液，pH6.7。 |
