用于制备经稳定转化的、能育的玉米植物的改良方法

摘要

本发明涉及改良的方法，所述方法借助于农杆菌介导的转化将DNA掺入玉米植物基因组中。优选的是以专利保藏号PTA-6170和PTA-6171保藏于美国典型培养物保藏中心的玉米株系的用途。

主权项

用于制备转基因玉米植物的方法，其包括步骤：a.分离玉米植物的不成熟胚，和b.用共培养培养基将所述分离的不成熟胚与包含至少一个转基因T‑DNA且属于根瘤菌科的细菌共培养，所述不成熟胚未进行去分化处理，所述T‑DNA包含至少一个选择性标记基因，其中不成熟胚被置于琼脂共培养培养基表面的一层或多层滤纸上，或无琼脂培养基的平板中含液体共培养培养基溶液的一层或多层滤纸上，所述属于根瘤菌科的细菌具有Ti或Ri质粒的T‑DNA转移相关功能元件，和c.将所述共培养的不成熟胚转移至恢复培养基，所述恢复培养基包含：i.有效量的至少一种抗生素，其抑制或阻抑属于根瘤菌科的细菌生长，和ii.浓度从1g/l到10g/l的L‑脯氨酸，和iii.浓度从1μM到50μM的硝酸银，iv.有效量的至少一种生长素化合物，但是不 含有效量的毒害植物的选择剂，和d.诱导胚性愈伤组织形成，并在培养基上选择转基因愈伤组织，所述培养基包含：i.有效量的至少一种生长素化合物，和ii.有效量的选择剂，所述选择剂允许选择包含转基因细胞，和e.从所述转基因愈伤组织再生并选择植物，所述植物含有转基因T‑DNA。