一种可溶性的多糖-蛋白交联抗原的制备方法

摘要

一种可溶性的多糖-蛋白交联抗原的制备方法，涉及多糖-蛋白交联物的化学合成方法。本方法含有将可溶性抗原多糖与蛋白通过双功能团交联试剂共价连接的化学合成步骤，以及离子交换分离和凝胶柱层析分离结合的纯化步骤。采用的双功能团交联试剂为(C2H3O)-(CH2)n-(C2H3O)，n＝2—10，(C2H3O)为环氧基团；选用吐温或SDS或TritionX-100为表面活性剂。本发明提供的交联方法操作简单，试剂来源方便，无毒性。

主权项

一种可溶性的多糖‑蛋白交联抗原的制备方法，其特征在于：采用的双功能团交联试剂为1，4‑丁二醇二缩水甘油醚，双功能交联基团分别与可溶性抗原多糖的羟基以及蛋白的氨基共价交联，其中所述的抗原多糖为来源于细菌的荚膜多糖，分子量2‑28万Da；所述的交联反应过程中可溶性抗原多糖与双功能团交联试剂的重量配比为1∶10‑20，pH11.0，反应温度50‑65℃；抗原多糖与载体蛋白的摩尔比为1/2.4‑1/3.5；将可溶性抗原多糖与蛋白通过双功能团交联试剂共价连接过程中，需添加表面活性剂SDS或TritionX‑100；抗原多糖与载体蛋白交联反应后，需添加过量的甘氨酸封闭抗原多糖分子中残留的活性基团。