发明名称 杨梅突发性枝叶凋萎病病原菌鉴定方法
摘要 本发明提供一种杨梅突发性枝叶凋萎病病原菌鉴定方法,它包括:用解剖刀小心分离发病杨梅枝干的木质部和韧皮部,韧皮部和木质部分别剪成小块组织,不需要表面消毒,放置到PDA平板上,在25℃恒温箱培养2d后,挑取绒毛状真菌菌丝,转接到一个新的PDA平板上,25℃恒温箱继续培养5d后,取0.5cm2的纯化菌丝块用来做致病性接种实验。离体检测杨梅突发性枝叶凋萎病的病原菌方法可靠,速度快,不需要昂贵的材料,步骤简单,准确率高。
申请公布号 CN102191182B 申请公布日期 2013.03.13
申请号 CN201010537036.5 申请日期 2010.11.09
申请人 浙江省农业科学院 发明人 任海英;王汉荣;方丽;李岗
分类号 C12N1/14(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I 主分类号 C12N1/14(2006.01)I
代理机构 杭州赛科专利代理事务所 33230 代理人 陈辉
主权项 一种杨梅突发性枝叶凋萎病病原菌鉴定方法,其特征在于它包括:(1)、用解剖刀小心分离发病杨梅枝干的木质部和韧皮部,韧皮部和木质部分别剪成3‑4mm2的小块组织,不需要表面消毒,轻轻放置到PDA平板上,在25℃恒温箱培养2d后,挑取绒毛状真菌菌丝,转接到一个新的PDA平板上,25℃恒温箱继续培养5d后,取0.5cm2的纯化菌丝块用来做致病性接种实验;(2)、在培养皿内平铺好滤纸,用无菌水浸湿,取新生的杨梅嫩梢,剪成5‑6cm长的短枝,使9cm的培养皿能水平放置2根短枝;每根短枝上撕掉两个叶片并露出叶痕,用步骤1中获得的0.5cm2的纯化菌丝块轻轻放置到露出的叶痕位置,在短枝的两端用脱脂棉吸水保湿;置于25℃的培养箱内,12h光照和12h黑暗;培养4天后调查杨梅嫩梢的发病情况;如果接种的叶痕位置变黑即为拟盘多毛孢属致病症状。
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