一种提高里氏木霉纤维素酶液体深层发酵水平的方法

摘要

本发明提供了一种提高里氏木霉纤维素酶液体深层发酵水平的方法，其中，包括以下步骤：一级种子培养：将PDA斜面培养基上活化后的里氏木霉(Trichoderma reesei CICC 13052)菌株制备成孢子悬液，按照3％的接种量接种于新鲜的种子培养基中进行培养；发酵培养：将处于对数生长期的一级种子液按照5％接种量接种至新鲜的发酵培养基中进行培养，分段控制发酵过程中罐内的pH值和溶解氧，使pH值和溶解氧在不同时段维持在不同的水平，并进行补料控制培养。通过本发明的方法发酵168小时结束，采用国际理论与应用化学联合会(IUPAC)推荐的国际标准方法测定发酵液酶活，得到滤纸酶活为14.2IU/mL，比工艺优化前间歇发酵酶活水平(8.5IU/mL)提高了67.1％。

主权项

一种提高里氏木霉纤维素酶液体深层发酵水平的方法，其中，包括以下步骤：一级种子培养：将PDA斜面培养基上活化后的里氏木霉菌株或其衍生菌株或其突变株制备成孢子悬液，按照第一百分比的接种量接种于新鲜的种子培养基中进行培养；发酵培养：将处于对数生长期的一级种子液按照比第一百分比大的第二百分比的接种量接种至新鲜的发酵培养基中进行培养，分段控制发酵过程中罐内的pH值和溶解氧，使pH值和溶解氧在不同时段维持在不同的水平，并进行补料控制培养；其中，所述发酵培养条件及控制策略为：发酵开始至24～36小时对发酵罐内pH和溶解氧不加控制，24～36小时后控制发酵液pH维持在4.5～5.5，24～90小时控制发酵液中溶解氧维持在25～55％，90小时后维持在15～30％直至发酵结束，并且发酵36～48小时后开始加入新鲜补料培养基直至72～90小时，总发酵时间为140～200小时，停止发酵。