一种评价CD20靶位治疗药物及手段的体外检测方法

摘要

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种评价CD20靶位治疗药物及手段的体外检测方法。本发明公开的体外检测方法，能够快速、准确、高效的对CD20靶位治疗药物及手段的细胞杀伤生物活性进行检测，该方法专属性好、特异性强、准确性高，活性测定范围达到50%-150%；精密度高，重复性、日间差以及人员操作误差RSD均小于10%，并且三复孔的CV%小于20%，4参数拟合的拟合常数R2均大于0.98。此外，本发明并不需要十分昂贵的仪器和繁琐的操作，便于推广以及高通量操作，完全能够满足其在进行具有针对CD20靶位、抑制肿瘤细胞生长活性的治疗药物及手段的筛选及其稳定性评价的需要。

主权项

一种评价CD20靶位治疗药物及手段的体外检测方法，包括下列步骤：a 取对数生长期表达CD20的细胞，用基础培养基制成细胞悬液，计数并计算细胞密度及活率，调整活细胞密度为n×105个/ml，将细胞悬液等体积加入细胞培养板孔中，同时设立空白对照孔，空白对照孔加入等体积基础培养基；b 取对照品及待测样品，用基础培养基进行系列梯度稀释，得到系列稀释浓度的对照品及待测样品；c 将系列稀释浓度的对照品及待测样品依次加入步骤a所述细胞培养板孔中，空白对照孔则加入等体积的基础培养基，然后将细胞培养板放置于37℃、5%二氧化碳培养箱中培养10‑20min；d 取人血清，用基础培养基进行稀释，依次加入步骤c所述细胞培养板孔和空白对照孔中，使人血清的浓度为3%‑7%，然后将细胞培养板放置于37℃、5%二氧化碳培养箱中培养45‑75min；e 采用检测活细胞或死细胞量的检测体系对细胞培养板进行显色反应；f 显色反应完成后，测定显色反应的结果，并根据测定结果计算待测样品的细胞杀伤生物活性。