一种利用精蛋白硫酸盐提高基因转染猪皮转染效率的方法

摘要

本发明涉及一种利用精蛋白硫酸盐提高基因转染猪皮转染效率的方法，包括如下步骤：1)制备待转染的猪皮肤；2)使用浓度为500-10000μg/ml精蛋白硫酸盐对108PFU/ml Ad5重组腺病毒载体进行震荡混合，孵育后制备成转染液；3)将步骤2)制备的转染液对步骤1)制备的猪皮肤进行转染。本发明中精蛋白硫酸盐与Ad5重组腺病毒载体混合后转染猪皮肤细胞时，其携带的阳离子可中和腺病毒载体和细胞表面的阴离子，降低了腺病毒载体和细胞表面之间的静电排斥力，从而增加腺病毒载体与猪皮肤细胞的相互接触，提高腺病毒载体对猪皮肤的转染效率。

主权项

一种利用精蛋白硫酸盐提高基因转染猪皮转染效率的方法，其特征在于包括如下步骤：1）制备待转染的猪皮肤；2）使用浓度为500‑10000μg/ml精蛋白硫酸盐对108PFU/ml Ad5 重组腺病毒载体进行震荡混合，孵育后制备成转染液；所述Ad5 重组腺病毒载体含有CTLA4Ig重组基因；3）将步骤2）制备的转染液按0.8－2.2ml/cm2的比例对步骤1）制备的猪皮肤在 CO2培养箱内37℃转染1－3小时。