军团菌快速检测与分型方法

摘要

本发明公开了一种军团菌快速检测与分型方法，其步骤包括如下：军团菌快速检测与分型方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取检测标本的基因组DNA；(2)以基因组DNA为模板进行PCR，得到PCR产物；(3)对PCR产物作琼脂糖凝胶电泳分析检测出有无军团菌；(4)对检测出阳性PCR产物进行酶切反应，对酶切反应产物作琼脂糖凝胶电泳分析进行分子分型。与现有技术相比，本发明军团菌快速检测与分型方法能快速、简便检测出军团菌，且能将其分子分型为嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌等。

主权项

军团菌快速检测与分型方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取环境水检测标本的基因组DNA；(2)以上取得的基因组DNA为模板，加入由序列为AGGGTTGATAGGTTAAGAGC的Primer226F和序列为 ATTCCACTACCCTCTCCCATACTCGAGTCAACC的Primer226R组成的一对引物进行PCR反应，得到PCR产物；(3)对PCR产物作琼脂糖凝胶电泳分析检测出有无军团菌；(4)对检测出阳性PCR产物用识别位点为“ACNGT”的限制性核酸内切酶HpyCH4III进行酶切反应，对酶切反应物作琼脂糖凝胶电泳分析进行分子分型，经过酶切后，若出现180bp+46bp两条带则说明被检出的军团菌为嗜肺军团菌，若出现153bp+73bp两条带则说明被检出的军团菌为非嗜肺军团菌的菲氏军团菌或昆氏军团菌。