分批补加氮源培养真菌生产纤维素酶的方法

摘要

本发明公开了一种分批补加氮源培养真菌生产纤维素酶的方法，包括如下步骤：培养基在发酵罐中以60%~80%的装液量于121℃灭菌20min，降温至培养温度28~30℃；以装液量1%~5%的接种量接种真菌种子液于发酵罐中发酵；分别在发酵培养第2~3天及4~5天补加质量为初始培养基中氮源对应质量的0.25~0.5倍的无机氮源及有机氮源。本发明通过前期添加少量的N源在降低发酵液渗透压的同时降低初始培养基的营养，抑制菌丝的过量繁殖，避免大量的营养用于菌丝生长，发酵后期通过分批补氮源，在限制营养用于菌丝生长的同时保证纤维素酶合成所需要的营养供给，提高营养的利用率，获得更高的发酵纤维素酶活。

主权项

分批补加氮源培养真菌生产纤维素酶的方法，其特征是该纤维素酶的生产方法包括如下步骤：（1）培养基的配制：以纤维质原料为唯一碳源及产酶诱导剂，玉米浆(CSL)、蛋白胨、酵母膏中的一种或几种作为培养基的有机氮源，铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、氨水一种或几种的组合作为培养基的无机盐氮源，配制培养基，于121℃灭菌20min，培养基在发酵罐中的装液量以发酵罐装液容量的60%~80%为宜；（2）接种与发酵：以培养基体积的1%~5%（v/v）的接种量接种真菌种子液于发酵罐中发酵，发酵过程参数控制为：温度为28~30℃，溶解氧不低于10%~20%，通气量为0.1~0.3vvm ；（3）过程补料：根据发酵过程中真菌的生长与产酶的特性分别在发酵培养第2~3天及4~5天补加质量为初始培养基中无机氮源质量的0.25~0.5倍的无机氮源或质量为初始培养基中有机氮源质量的0.25~0.5倍的有机氮源，或同时补加质量为初始培养基中氮源对应质量的0.25~0.5倍的无机氮源及有机氮源。