转基因棉花多重PCR-DHPLC检测引物及检测方法

摘要

本发明公开了一种转基因棉花的多重PCR-DHPLC检测引物及检测方法，所述引物具有较强的特异性，能够用于PCR扩增以及DHPLC分析。所述检测方法提供了一种操作简便、扩展性能好、灵敏度高的转基因棉花检测方法，实现了转基因棉花的多靶标检测。利用DHPLC对PCR扩增产物进行分析，其片段大小区分率可达数个碱基，分辨率高。本发明的引物和检测方法为转基因棉花检测提供了一种简单、方便、有效、可靠的高通量检测方法，特别适合用于口岸检验检疫、农业生产、植物保护等部门使用。

主权项

用于转基因棉花多重PCR‑DHPLC检测的引物，其特征在于：所述引物包括引物对1，以及引物对2、引物对3、引物对4中的至少一个；引物对1的上游引物含有Seq ID No.1所示序列，下游引物含有Seq ID No.2所示序列；引物对2的上游引物含有Seq ID No.3所示序列，下游引物含有Seq ID No.4所示序列；引物对3的上游引物含有Seq ID No.5所示序列，下游引物含有Seq ID No.6所示序列；引物对4的上游引物含有Seq ID No.7所示序列，下游引物含有Seq ID No.8所示序列；Seq ID No.1：5’‑TCCATGCCGCCTCACAAG‑3’Seq ID No.2：5’‑CCCAGCCCTCCAAAGATT‑3’Seq ID No.3：5’‑TTGAAATTAAAAACCAATGCCAC‑3’Seq ID No.4：5’‑GATGTTAGTTTCCCATTCGAGTTT‑3’Seq ID No.5：5’‑AACGGGCGGAAACCCTTG‑3’Seq ID No.6：5’‑GCAATTACCTTACTGCCAATAAAGC‑3’Seq ID No.7：5’‑TGTCATCTATGTTACTAGATCGGGG‑3’Seq ID No.8：5’‑GCCGAACGCTGTTATCCTCAT‑3’。