发明名称 检测雪白丝衣霉菌的实时荧光PCR试剂盒和检测方法
摘要 本发明提供了一种检测雪白丝衣霉菌(Byssochlamys nivea)的实时荧光PCR试剂盒和检测方法。所述试剂盒主要包括特异性引物和荧光探针、PCR缓冲溶液、dNTP混合物(三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸和三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸的摩尔比为1:1:1:1混合)、MgCl2和DNA聚合酶,所述特异性引物和荧光探针序列如下:上游引物:5′-GGTTGTTGTTGACTTCCCTGATG-3′,下游引物:5′-CCATGGTACCAGGCTCAAGGT-3′,荧光探针:5′-FAM-ACGCTCCATATGCTGACCCTCCTCCTAG-BHQ1-3′,其中FAM为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团。本发明的有益效果主要体现在:检测敏感性高,特异性好,具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。
申请公布号 CN102952887A 申请公布日期 2013.03.06
申请号 CN201210512577.1 申请日期 2012.11.30
申请人 浙江省质量检测科学研究院 发明人 张慧;姜侃;陈小珍;汪新
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 浙江杭州金通专利事务所有限公司 33100 代理人 刘晓春
主权项 一种检测雪白丝衣霉菌(Byssochlamys nivea)的实时荧光PCR试剂盒,所述试剂盒包括特异性引物、荧光探针、PCR缓冲液、dNTP混合物、MgCl2和DNA聚合酶;所述dNTP混合物由三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸腺嘌呤脱氧核苷酸、三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸和三磷酸胞嘧啶脱氧核苷酸组成,它们的摩尔比为1:1:1:1混合,其特征在于所述特异性引物和荧光探针序列如下:上游引物:5′‑GGTTGTTGTTGACTTCCCTGATG‑3′下游引物:5′‑CCATGGTACCAGGCTCAAGGT‑3′荧光探针:5′‑FAM‑ACGCTCCATATGCTGACCCTCCTCCTAG‑BHQ1‑3′其中FAM为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团。
地址 310013 浙江省杭州市天目山路222号