高灵敏度的突变基因检测方法

摘要

作为可以迅速、简便、高精度、而且高灵敏度地检测掺杂于基因库中的突变基因的有无的方法，提供各种高灵敏度检测方法、特别是PNA-LNA-PCRClamp法的改良方法。作为主要检测步骤的前步骤，实施下述前扩增步骤，其中，使（1）钳引物，其由与具有野生型基因的序列或野生型基因的互补序列的目标部位的全部或一部分杂交的PNA构成，（2）可以对包含具有突变基因的序列的目标部位的区域进行扩增的引物，与（3）前述基因库，在基因扩增用反应液存，通过基因扩增方法对包含突变基因的目标部位的区域选择性地进行扩增。

主权项

突变基因检测方法，其是检测掺杂于基因库中的已知突变基因的有无的方法，该方法包括：（1）使（1a）钳引物，其由与具有野生型基因的序列或野生型基因的互补序列的目标部位的全部或一部分杂交的PNA构成，（1b）可以对包含具有突变基因的序列的目标部位的区域进行扩增的引物，与（1c）前述基因库，在基因扩增用反应液中共存，通过基因扩增方法对包含突变基因的目标部位的区域选择性地进行扩增的步骤；（2）将前述步骤（1）中所得的扩增产物或其一部分作为模板，通过基因检测方法对包含突变基因的目标部位的检测区域选择性地进行检测，由此检测该突变基因的有无的步骤。