一种明胶-壳聚糖-透明质酸-硫酸肝素复合三维支架及其制备方法

摘要

本发明涉及一种明胶-壳聚糖-透明质酸-硫酸肝素复合三维支架及制备方法，属于生物医学技术领域。本发明采用明胶、壳聚糖、透明质酸及硫酸肝素四种材料，以不同的配比混合得到不同浓度的混合物，通过冷冻干燥法制取的一类明胶-壳聚糖-透明质酸-硫酸肝素多孔三维复合支架，此支架的孔径、孔隙率、降解率、吸水率等可以通过各成分含量及冷冻干燥条件来调控，能满足支架材料基本要求，可用于NS/PCs的生长、增殖及分化的研究。透明质酸使得细胞在支架中分布均匀，硫酸肝素能够结合生长因子，从而使细胞的生长增殖情况与体内情况更为相似，而且复合支架中含有更多的氨基、羧基、羟基、磺酸基、酰胺基等官能团，更适合细胞的粘附、生长、增殖等。

主权项

一种明胶‑壳聚糖‑透明质酸‑硫酸肝素复合三维支架的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）60℃的水浴下将明胶,透明质酸,硫酸肝素一起溶于水，制成其含量分别为：1.4%~2%明胶（W/V），0.028%~0.04%透明质酸（W/V），0.028%~0.04%硫酸肝素（W/V）的混合溶液；壳聚糖溶于2%（V/V）的乙酸，制成1.4%~2%（W/V）的壳聚糖溶液；（2）将制取的混合溶液和壳聚糖溶液按8:2~2:8混合，迅速高速旋转震荡使四种成分充分混匀，制得明胶‑壳聚糖‑透明质酸‑硫酸肝素混合溶液；（3）将上述（2）制得的混合溶液注入模具，‑80℃预冻4 h，冷冻干燥24 h，制作支架；（4）支架成型后，以含50 mmol／L 2‑吗啉乙烷磺酸、50 mmol／L碳化二亚胺，50 mmol／L N‑羟基琥珀酰亚胺和40%（V/V）乙醇的交联剂室温交联支架6 h；移去交联剂，以pH值7.4、0.1 mol／L的 Na2HPO4缓冲液室温孵育2 h，中和残留乙酸；用40%（V/V）的乙醇清洗,双蒸水冲洗至中性,预冻2 h，再次冷冻干燥24h，即得明胶‑壳聚糖‑透明质酸‑硫酸肝素复合三维支架。