双试剂法检测间接胆红素试剂盒及制备方法

摘要

本发明公开了一种血清中间接胆红素的双试剂测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：重氮试剂在试剂I中，试剂II仅有加速剂有效成分，其测定方法为：使用前试剂A与试剂B按20∶1体积比混合成试剂I，血清先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中直接胆红素与反应液中氯化重氮苯磺酸反应生成偶氮胆红素，再加入试剂II后于37℃温浴4～7分钟，间接胆红素在加速剂的作用下，使间接胆红素氢键破坏后与氯化重氮苯磺酸反应生成偶氮胆红素。仪器在540～550nm波长处检测，以试剂I反应产生的偶氮胆红素为空白，由试剂II反应产生的偶氮胆红素计算出间接胆红素的含量。

主权项

一种血清中间接胆红素的双试剂测定方法，其特征在于重氮试剂在试剂I中，试剂II仅含有加速剂有效成分，其测定方法为：血清先与试剂I于37℃温浴3～5分钟，血清中直接胆红素与试剂I的反应生成偶氮胆红素，再加入试剂II后于37℃温浴4～7分钟，间接胆红素在加速剂的作用下，间接胆红素氢键被破坏，与重氮试剂反应生成偶氮胆红素，仪器在540nm波长处检测，以试剂I反应产生的偶氮胆红素为空白，由试剂II反应产生的偶氮胆红素计算出间接胆红素的含量，计算公式为：ODIBiL＝OD27‑OD10×[(SV+RIVI)/(SV+RIVI+RIIVII)]间接胆红素浓度＝F×ODIBiL其中ODIBiL是间接胆红素产生的吸光度，OD10是样品加入试剂I反应后测得的吸光度，OD27是样品加入试剂II反应后测得的吸光度，SV是血清样品的体积，RIVI是试剂I的体积，RIIVII是试剂II的体积，F是校正因数。