| 摘要 |
1. Способ амплификации нуклеиновой кислоты вируса гепатита С (HCV) из HCV-инфицированного образца, предусматривающий амплификацию сегмента ДНК-матрицы, комплементарного РНК-геному HCV из указанного образца, путем двухстадийной полимеразной цепной реакции (ПЦР), в которой на первой стадии ПЦР используется первый внешний праймер и второй внешний праймер, а на второй стадии ПЦР используется первый внутренний праймер и второй внутренний праймер, гдеi) нуклеотидная последовательность первого внешнего праймера содержит SEQ ID NO:2:5'-GAGTAGTGTTGGGTCG-3' (SEQ ID NO:2),ii) нуклеотидная последовательность второго внешнего праймера содержит SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4:5'-CACGCTGTGATAAATG-3' (SEQ ID NO:3) или5'-CAVGCTGTGATATATG-3' (SEQ ID NO:4),где V представляет собой А, С или G;iii) нуклеотидная последовательность первого внутреннего праймера содержит SEQ ID NO:5:5'-GGTGCTTGCGAGTGCC-3' (SEQ ID NO:5), иiv) нуклеотидная последовательность второго внутреннего праймера содержит SEQ ID NO:6 или SEQ ID NO:7:5'-TAGCCAGCCGTGAACC-3' (SEQ ID NO:6) или5'-TARCCAGCRACGAACC-3' (SEQ ID NO:7),где R представляет собой А или G.2. Способ по п.1, в котором каждый из внутреннего и внешнего праймеров независимо является 15-50-членным.3. Способ по п.1 или 2, в которомa) нуклеотидная последовательность первого внешнего праймера содержит нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO:9, где необязательно один, два или три нуклеотида в положениях от 1 до 14, считая от 5'-конца SEQ ID NO:9, независимо являются нуклеотидами, отличными от тех, которые представлены в SEQ ID NO:9:5'-CAAGACTGCTAGCCGAGTAGTGTTGGGTCG-3' (SEQ ID NO:9); иb) нуклеотидная последовательность второго внешнего праймера содержит нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO:10 или SEQ ID NO:11, где необязательно один, два или три нуклеотида в |
