主权项 |
一种菌根食用菌菌种的保藏方法,其特征在于:所述的菌根食用菌菌种的保藏方法包括如下步骤:a、将菌根菌的孢子或子实体组织放入改良的琼脂培养基中培养菌丝体;其中经改良的琼脂培养基的组成如下:Cacl2,0.03~0.07g;Nacl,0.018~0.03g;KH2Po4,0.4~0.65g;MgSo4·7H2O,0.13~0.2g;维生素B1,80~200μg;Fecl3·6H2O,0.012~0.036g;(NH4)2HPo4,0.23~0.27g;葡萄糖,10~30g;大麦芽汁250~450mL;琼脂条,15~20g;补蒸馏水至1000mL,pH值5.1~5.8;b、将菌丝体接入液体培养基中培养;其中液体培养基的组成如下:Cacl2,0.03~0.07g;Nacl,0.018~0.03g;KH2Po4,0.4~0.65g;MgSo4·7H2O,0.13~0.2g;维生素B1,80~200μg;Fecl3·6H2O,0.012~0.036g;(NH4)2HPo4,0.23~0.27g;葡萄糖,10~30g;大麦芽汁250~450mL;补蒸馏水至1000mL,pH值5.1~5.8;c、将上述培养的菌丝体经匀质器匀质并再次接入液体培养基中培养,直到菌丝体的菌丝球直径达到0.2‑1.5cm为止;d、将以上培养好的菌丝球转入螺口小玻璃管中或连同培养容器一起密封保藏;a步骤中,所述培养菌丝体是放入培养室中培养,培养室的温度为15‑25℃,菌丝的生长时间为25‑45天,直到菌丝体长满培养基表50‑80%,b步骤中,所述培养是放在往返式摇床上培养,培养条件为20‑28℃、湿度55~75%、120‑180转/分钟,培养7‑21天;c步骤中,所述液体基是与b步骤中相同的液体培养基,并放置于震荡培养箱内培养,培养条件为温度15‑28℃、湿度55~75%,转速120‑180转/分钟,培养7‑21天,直到菌丝球直径达到0.2‑1.5cm为止;d步骤中,将菌丝球与终培养液一同放入螺口小玻璃管中保藏,保藏温度1‑25℃、湿度55‑75%。 |