发明名称 |
高表达高比活皮蝇胶原酶突变体序列、毕赤酵母表达质粒的构建及菌株筛选和纯化方法 |
摘要 |
本发明涉及皮蝇胶原酶(HlCollagenase)突变体的序列及其分泌表达的酵母菌株HlCollagenase-m/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产高活性皮蝇胶原酶的纯化方法。本发明采用基因工程表达的方法生产高活性的皮蝇胶原酶突变体,比活性达到1320国际单位/毫克,表达量达到241毫克/升蛋白,通过纯化可获得纯度达95%以上的目标蛋白皮蝇胶原酶,为皮蝇胶原酶今后的推广使用奠定良好基础。 |
申请公布号 |
CN102660524B |
申请公布日期 |
2013.02.20 |
申请号 |
CN201210141391.X |
申请日期 |
2012.05.09 |
申请人 |
海南华研生物科技有限公司 |
发明人 |
陈海宁;程云开 |
分类号 |
C12N9/64(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/64(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种皮蝇胶原酶(Hl Collagenase)突变体,其氨基酸序列为如下序列ValIleCysGlyGlySerLeuIleAspAsnLysTrpIleLeuThrAlaAlaHisCysValHisAspAlaValSerValValValTyrLeuGlySerAlaValGlnTyrGluGlyGluAlaValValAsnSerGluArgIleIleSerHisSerMetPheAsnProAspThrTyrLeuAsnAspValAlaLeuIleLysIleProHisValGluTyrThrAspAsnIleGlnProIleArgLeuProSerGlyGluGluLeuAsnAsnLysPheGluAsnIleTrpAlaThrValSerGlyTrpGlyGlnSerAsnThrAspThrValIleLeuGlnTyrThrTyrAsnLeuValIleAspAsnAspArgCysAlaGlnGluTyrProProGlyIleIleValGluSerThrIleCysGlyAspThrSerAspGlyLysSerProCysPheGlyAspSerGlyGlyProPheValLeuSerAspLysAsnLeuLeuIleGlyValValSerPheValSerGlyAlaGlyCysGluSerGlyLysProValGlyPheSerArgValThrSerTyrMetAspTrpIleGlnGlnAsnThrGlyIleLysPhe。 |
地址 |
570102 海南省海口市龙华区义龙西路21号侨汇大厦15楼 |