用于克隆和操作基因组的方法

摘要

本文公开了用于在异源宿主细胞中克隆合成的或半合成的供体基因组的组合物和方法。在一种实施方式中，供体基因组可在宿主细胞中被进一步修饰。修饰的或未修饰的基因组可进一步从宿主细胞分离并转移到受体细胞。本文公开的方法可用于在更加容易处理的宿主细胞中改变来自难处理供体细胞的供体基因组。

主权项

用于产生合成细胞的方法，所述方法包括：(i)作为一条或多条片段，装配合成的或半合成的供体基因组；(ii)将所述供体基因组和宿主载体引入异源宿主细胞，其中任选地所述供体基因组和所述宿主载体在引入所述宿主之前连接；(iii)从所述宿主细胞中回收所述供体基因组；和(iv)将所回收的供体基因组引入受体细胞；从而生成包含所述供体基因组的合成细胞，其中所述供体基因组是基本上完整的细胞、病毒或细胞器基因组，其至少是最小基因组，且长度大于大约300kb。