| 摘要 |
Las muestras del auxotipo de NG estuvieron presentes en las mezclas de reacción a concentraciones finales en elintervalo de 10-1000 moléculas por reacción. Cada mezcla de reacción comprendía una concentración final de 0,40uM de cebador directo de CT (SEQ ID NO: 1), 0,20 uM de cebador inverso de CT (SEQ ID NO: 4), 0,10 uM sondabaliza de CT (SEQ ID NO: 7), 0,20 uM de cebador directo de NG (SEQ ID NO: 8), 0,20 uM de cebador inverso deNG (SEQ ID NO: 9), 0,10 uM sonda baliza de NG (SEQ ID NO: 12), 3 unidades de ADN polimerasa AmpliTaq,dNTPs 1 mM, y MgCl2 8 mM en Tampón 1x PCR II. La reacciones se sometieron a ciclación 45 veces a 95ºC/30 segy 59ºC/1 min para la amplificación del ADN, seguido por 1 ciclo a 95ºC/3 min y 25ºC/10 min para la desnaturalizaciónfinal y el recocido de la sonda. Se sometieron a ensayo 6 auxotipos de NG, y todos los auxotipos sometidos a ensayo se detectaron con altasensibilidad (10 copias por reacción), utilizando los conjuntos de cebador/sonda de la invención. Además, no seobservó reactividad cruzada con el conjunto de cebador de CT incluso cuando estaba presente NG a una altaconcentración (107 moléculas de NG por reacción). |
