发明名称 一种提取植物总蛋白的方法
摘要 本发明公开了一种提取植物总蛋白的方法,特备是一种提取番茄植株韧皮部总蛋白的方法。本发明提供的方法包括如下步骤:(1)取植物材料,加入PVPP和石英砂,用液氮研磨成粉末;(2)取粉末,加入蛋白质提取缓冲液并振荡匀浆,然后加入Tris饱和酚进行提取,取有机相;(3)取有机相,与蛋白质沉淀液混合后静置,然后离心收集沉淀;(4)取沉淀,依次进行甲醇清洗、丙酮清洗和冷冻干燥,得到植物总蛋白。本发明提供的方法主要改进点在于:(1)在样品研磨破碎过程中添加PVPP来吸附酚类物质,在提取过程中吸附酚类物质后可以通过离心去除,不会干扰下游分析过程;(2)提取过程中添加多种蛋白酶,最大限度的保持植物材料中的蛋白质的活性与自然特性。
申请公布号 CN102924566A 申请公布日期 2013.02.13
申请号 CN201210447423.9 申请日期 2012.11.09
申请人 北京农学院 发明人 王绍辉;杨瑞;郝敬虹;邢佳毅
分类号 C07K1/30(2006.01)I;G01N1/28(2006.01)I 主分类号 C07K1/30(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅
主权项 一种提取植物总蛋白的方法,包括如下步骤:(1)取植物材料,加入PVPP和石英砂,用液氮研磨成粉末;(2)取步骤(1)得到的粉末,加入蛋白质提取缓冲液并振荡匀浆,然后加入Tris饱和酚进行提取,取有机相;(3)取步骤(2)得到的有机相,与蛋白质沉淀液混合后静置,然后离心收集沉淀;(4)取步骤(3)得到的沉淀,依次进行甲醇清洗、丙酮清洗和冷冻干燥,得到植物总蛋白。
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