酵母中自组装的具有免疫原性的肠道病毒病毒样颗粒的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及一种制备肠道病毒病毒样颗粒的方法，以及一种可展示外源抗原的重组肠道病毒病毒样颗粒的制备方法。本发明优点在于：本发明提供了一种新型的酵母来源的小RNA病毒科肠道病毒属病毒样颗粒的制备方法及其免疫原性检测的方法，以及以肠道病毒病毒样颗粒作为一种全新的多价免疫原展示平台的应用方法，免疫试验证明本发明制备的肠道病毒病毒样颗粒可产生保护性中和抗体。

主权项

一种制备肠道病毒病毒样颗粒的方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）优化P1基因，构建表达P1蛋白的pYES2载体重组子； （b）构建具有色氨酸缺陷互补基因且敲除Ura缺陷互补基因的改造载体pYES2‑Trp，优化3CD基因，构建表达3CD蛋白的pYES2‑Trp载体重组子；（c）将步骤（a）和步骤（b）中构建的载体重组子共同转化进入酿酒酵母表达菌株，酵母培养发酵；（d）将步骤（c）中培养的酵母进行破碎、纯化和鉴定，即得肠道病毒病毒样颗粒，所述的肠道病毒病毒样颗粒由VP0、VP1、VP3三种蛋白单体组成。